توليد كاهوي تراريخته حاوي ژن پروانسولين انساني در ايران
محبالديني در ادامه تصريح کرد: مهندسي ژنتيک کاهو به يک روش موثر و قابل اتکاي کشت بافت نياز دارد. براي اين منظور، عوامل مختلف موثر بر باززايي کوتيلدونهاي کاهو از قبيل ژنوتيپ، سن ريزنمونه و غلظتهاي مختلف تنظيم کنندههاي رشد بررسي شدند. بالاترين ميزان کالوسزايي در غلظت 2.7 ميکرومولار NAA و 4.4 ميکرومولار BA بدست آمد. بالاترين ميزان نوساقهزايي در غلظتهاي کم BA اتفاق افتاد.
وي خاطرنشان كرد: شرايط بهينهاي براي تراريختهسازي از همکشتي نمونههاي کوتيلدوني با اگروباکتريوم در محيط MS بدون هيچ گونه هورمون رشدي به مدت 48 ساعت بدست آمد. بعد از مرحله همکشتي، نمونههاي کوتيلدوني روي محيط کشت انتخابگر حاوي هيگرومايسين و سفوتاکسيم کشت شدند. بعد از انتقال کوتيلدونها به محيط انتخابگر و پس از چند بار واکشتي ريزنمونهها، گياهان کاهوي تراريخت بدست آمدند.
محبالديني افزود: با استفاده از آناليز PCR و Southern Blotting، حضور قطعه T-DNA حاوي ژن پروانسولين انساني در ژنوم کاهو اثبات شد و همچنين انجام RT-PCR نسخهبرداري از روي اين ژن را تأييد كرد. آناليز گياهان تراريخته در سطح پروتيين با بهرهگيري از آزمونهاي ELISA و ايمونوبلاتينگ وجود پروتيين در گياهان تراريخته را تأييد کردند.
به گزارش ايسنا، اين پژوهش با راهنمايي دكتر مختار جلالي، عضو هيات علمي دانشکده کشاورزي دانشگاه تربيت مدرس انجام شده است.